尹长安 教授 宁夏大学
2012-9-19
（一）准备工作
1. 药物的配制
（1）计量单位：药物重量以克为单位，容量以毫升为单位，器械长度以厘米为单位。
（2）药物配制方法 75%酒精：用96%酒精78毫升，加蒸馏水22毫升。如果买来的酒精浓不准确，可用酒精刻度计测量。再根据测量结果进行配制。
0.9%氯化钠溶液：每100毫升蒸馏水中，加化学纯净氯化钠0．9克，使充分溶化，用定性滤纸过滤两次。
2%重碳酸钠或1．5%碳酸钠溶液：每100毫升温开水中，加2克重碳酸钠或1．5克碳酸钠，使其充分溶化。如果用化学碱面时，可按2%重碳酸钠溶液的剂量制作棉球，具体作法是将消毒药棉撕散，团成直径2厘米或3厘米的圆球，将作好的棉球分装于有盖广口瓶或搪瓷缸里。浸入96%酒精、65%酒精或0．9%氯化钠溶液，使棉球全部湿润，即为酒精棉球或氯化钠棉球。酒精棉球以湿润为度，氯化钠棉球经过消毒以后使用。
凡士林的处理：将白色凡士林加温熔化，用双层纱布过滤，盛于有盖广口瓶或搪瓷缸里。
（3）药物配制要求
①氯化钠溶液是用作绵羊人工授精中的稀释液和冲洗液的，因此，须用化学纯净瓶装的氯化钠配制。存放时间过长，或已潮解的不宜使用。
②配药剂量要精确，不许任意增减药量。
③酒精挥发较快，杀菌效力好，挥发后无残存气味，是理想的人工授精消毒剂。因此，不应随意用其他药品代替。
④蒸馏水应每隔五天制作一次，不宜存放过久以保证纯洁新鲜。蒸馏水对精子危害较大，因此，应防止与精液接触。
⑤氯化钠溶液和棉球应保持清洁、新鲜，要作到当日使用，当日配制。
⑥盛装各种药物溶液剂的玻璃瓶，都应贴上标鉴，注明药名称、规格以便认别。
2.器械的洗涤和消毒：凡与精液接触的器械，都必须清洁、干燥、消毒、冲洗。其处理方法如下：
（1）器械用具的洗涤：人工授精器械、用具、在使用前要先用2%重碳酸钠溶液或1．5%碳酸钠溶液洗掉油腻，再用清水冲洗二、三次，最后用蒸馏水冲洗三次。器械清洗后，放在清洁操作台上或搪瓷盘，任其自然干燥。如果急用时，可用清洁毛巾擦干。
毛巾、纱布、台布、盖布，工作服等可用肥皂粉洗涤，再用清水淘洗几次。
（2）器械、用具的消毒：精子是很脆弱的，她与杂菌和微生物接触，就会使其活率降低甚至死亡，影响受胎率。因此，进行人工授精技术操作时要求做到无菌操作。消毒的方法很多，一般常用的消毒方法有药物（酒精）消毒，煮沸消毒（或用钢精锅蒸笼消毒）和火焰消毒。各种器械、用具和药液的消毒方法如下：
①假阴道、输精器、集精瓶：用65%酒精消毒，急用或连续使用时，用96%酒精消毒，但必须待酒精挥发后用0．9%氯化钠溶液彻底清洗，直到无残存酒精气味时方可使用。
②温度计、玻璃棒、吸管、橡皮台布和人的手指，都用65%酒精消毒。
③开膣器、镊子、瓷盘、瓷缸，用65%酒精或酒精火焰消毒。开膣器连续使用时，可用清水洗净，开水消毒。
④氯化钠溶液、凡士林、棉花球装入有盖广口瓶里，可用煮沸消毒（锅底应垫毛巾或折叠为四层的纱布），或用钢精蒸笼消毒。
⑤纱布、毛巾、载玻片、盖玻片用钠精蒸笼消毒。
（3）洗涤和消毒工作中应注意以下事项：新购买的器械，在洗涤前应先擦去油腻和污物再用清水彻底清洗干净。
所有经过消毒的药械用品，分别放在专用的瓷盘里，加盖消毒纱布，防止灰尘污染。
凡与精液接触的器械，使用前必须用0．9%氯化钠溶液冲洗三次。
煮沸消毒药械的时间，以水温升高到摄氏100度时，再经30分钟为标准。
（二）采精
采精是人工授精技术操作中的一个重要组成部分，在人工授精技术发展过程中，曾设计过许多采精的方法，但都存在缺点，实用价值不大。唯有应用假阴道法采精，较为理想。它的优点是：设备简单，操作容易，采得精液的质量都好。现在假阴道采精的方法，已在家畜人工授精实践中广泛应用。
1.假阴道的构造 假阴道是由坚硬的胶管（外壳）和柔软细薄的橡胶内胎组成。即内胎套在外壳里，内胎两端翻转于外壳上，形成双层圆形胶管。胶管的一端供公畜的阴茎伸入，一端安装集精瓶，在公畜射精时收集精液。外壳上有一小孔，可装气门活塞和开关，以便加温和加压。如在内胎上涂一层滑剂，调整水温和压力，就与母畜的服道相似。当公畜阴茎伸入，由于假阴道的温度、压力和滑润度，均与母畜阴道相同，就可使公畜射精。
2.采精前假阴道的准备 （1）首先检查内胎有无沙眼或破裂，而后使内胎光面向里，粗糙面向外套在外壳里。再用两腿夹住外壳的两端，并平整内胎，勿使扭折，松紧适度时，用厚橡皮圈将两端固定。
（2）参照器械洗涤、消毒、冲洗方法，顺序处理假阴道、集精瓶和集精瓶盖。
（3）按灌水、测温、涂滑剂的顺序，由外壳的小孔灌温水（摄氏50～55度）约150毫升，使水量约占假阴道长度的1/2。然后装上活塞开关，用消毒过的温度计测内胎温度，温度如在4－42度时，即用消毒过的玻璃棒0．5～1克白凡士林（滑剂，均匀地涂布于假阴道长度1/2的内胎上。
（4）在涂布滑剂的另一端，安装集精瓶，并包裹双层纱布。
（5）吹气加压，使假道内胎呈三角形。
3.采精方法（1）固定台羊。选择膘情好，体格大，发情旺的母羊，固定在采精架里。
（2）引导种公羊到台羊附近，擦净包皮。
（3）术者右手紧握假阴道，用食指和中指夹好集精瓶，并使开关向下，集精瓶一端向前，紧靠台母羊右侧臀部。公羊性欲冲动，由包皮排出部分副性腺分泌液，爬上母羊，阴茎伸出时，用左手指轻拨公羊阴茎包皮（勿接触龟头），将阴茎导入假阴道（假阴道与地平线呈35度角）。当公羊纵身向前时，即可判断为射精表现。公羊射精后，前蹄即自动着地，术者应立即将假阴道取下，并使集精瓶的一端向下，以免流出精液，同时扭动开关，擦净假阴道外部，取下集精瓶，加上瓶盖，送交检查室，报出公羊编号，以便检查登记。
4.采精应注意事项
（1）种公羊应排列编号，顺序进行采精。
（2）采精时假阴道温度不得低于38度，假阴道温度过低会引起阻抑反射，使公羊不易射精。更不得高于42度，过高对精子生存不利，且对公羊刺激过甚，破坏其性兴奋。
（3）采精时假阴道压力应适当，压力过大，公羊阴茎不易伸入；压力过小，使公羊不射精，或射精不完全。
（4）采精时假阴道润滑剂应适量并涂布均匀。润滑剂过少，会抑制公羊的射精反射；润滑剂过多，往往流入集精瓶中，影响精液品质。
（5）连续采精使用假阴道、集精瓶时，应按洗涤、消毒方法，依次处理。
（6）各公羊精液要随时用随时采，精液采出后争取在20分钟以内用完（保存运输精液时例外）。
（7）采精工作结束后，应及时清洗采精器具，并用清水冲净、用清洁毛巾擦干，放于专用盘里，盖清洁白布，以备下次使用。
（三）精液品质检查
精液品质的检查，是稀量公畜种用价值和保证授精效率的一项重要措施。通过检查，可以确定公畜精液有无受精能力。如果精液品质不良，即使公畜外貌好，血统好，生产性能高，也没有任何种用价值。
影响精液品质的因素很多，归纳起来有两种：一种是公畜本身的年龄、营养、健康状况，采精次数以及配种季节、气候条件等。另一种是由于采精方法不当，用具不良，或精液稀释处理不当等，使精液品质变坏。因此，在配种期前和配种期，必须定期检查公畜精液品质，才能保证授精效果。
通常检查公羊精液品质有下列几个项目：
1.外观检查：即采集公羊精液后，用肉眼观察射精量、色泽、精子活动状态和检查气味等。
（1）射精量：公羊射精数量的多少与授配母羊的头数和优良公羊的利用价值，有密切关系。公羊射精量愈多，利用价值愈大。公羊射精量测定方法，是在公羊射精后从有刻度的玻璃集精瓶外观察。如使用双层集精瓶或无刻度集精瓶时，可将精液吸到吸管里测定。通常公羊的射精量平均为1～2毫升，最高可达3．5毫升。
（2）精液色泽：正常的精液应为乳白色，或略带黄色。精液色泽如为灰白色，即表示精子密度稀薄；略带红色，可能混有血液；呈红褐色时，可能生殖道发炎或有破伤；呈深黄色时，可能混有尿液；呈黄绿色时，表示有脓液混入；出现弩状物时，可能精液囊发炎。由带有杂色不正常的精液，都不许使用，并停止公羊采精，由兽医检查治疗和加强饲养管理。
（3）精子活动状态：正常的精液所含的精子密度大，活率好，从外观可见精液呈回转滚动云雾状态。精子活率越强，翻滚越明显。凡属这种精液，应该认为中品质最好的精液。
2.显微镜检查：为了精确掌握精液品质，必须用显微镜放大进行检查。通过显微镜，可以检查精子的活率、密度、病态和抗力等。其检查步骤如下：
（1）精子密度：检查精子的密度，可以采用粗略的方法，即“精子密度评等法”；也可以采用较精细的方法，即“精子计数法”。
①精子密度评等法。用一小滴精液置于洁净载玻片上，再加盖玻片，使精子均匀分散，在载玻片上成为薄层，然后用显微镜放大400－600倍，依下列方法，评定精液中精子密度。
稠密――在视野里看到精子密度最大，精子之间无空隙处，即评为为“稠密”。在记载时可用“密”字表示。给母羊输精后所使用的精液，必须属于这一等级。
中等――在视野里看到精子之间有1～2个精子长度的空隙，并清晰地看到个别精子活动情况。即评为“中等”，可用“中”字表示。
稀薄——仅能看到分散的少数精子，彼此之间空隙很大，即评为“稀薄”，可用“稀”字表示。
无精子——视野里没有精子，即评为“无精子”，可用“无”字表示。
②精子计数法：计算一个单位容量的精液中精子数量的方法，一般采用医用“血球计数器”进行。
“血球计数器”的构造是一块具有精确而细密刻线的厚玻璃片，并附有红血球和白血球吸管各一个。厚玻片的刻线区域叫做计算室。全室9个大格，每大格面积1平方毫米，深度1/10毫米。中央一大格，由双线七分为25个中方格，每个中方格又划分为16个小方格，共计为４00个小方格。
公羊精子计数可按以下步骤进行：
稀释精液，用低倍显微镜找到计算室，取红血球吸管将精液吸到0．5刻度处，用纱布拭去吸管前端沾着的精液；；再吸3%氯化钠溶液（可以很快杀死精子）到101刻度处为止，用拇指和食指分别按住吸管两端，充分摇动，使精液与稀释液混合均匀，即将精液稀释为200倍。
制片：先吹去吸管前端稀释的精液，再吹出一滴于计算室上盖玻片的一侧，使精液扩散在整个计算室内，即可用显微镜放大400—600倍检查。计算室内如有气泡时，应重新制片。
计数：计算精子时，一般只数具有代表性的5个中方格的精子数。对跨在中方格边缘上的精子，应采取数上不数下，数左不数右的方法，每数完一个中方格，即随手记下精子数。当数完5个中方格时，即将5个中方格里的精子加成总数，按下列公式计算：
５个中方格内精总数／80（小方格数）×10（计算室高度）×400（计算室小方格总数）×200（稀释倍数）×1000（1毫升=1000立方毫升）=1（毫升精子总数）
例如：在五个中方格内精子总数为200个，一毫升精液中有多少精子依式代入：每一毫升精液中的精子数为：
200/80×10×400×200×1000=20亿
为了减少误差，必须进行两次计算。如两次误差大于10%，应做第三次计算。最后在三次计算中，选两次误差小于10%的，求出平均数，即得出较正确的精子数。
（2）精子活率：精子活率，是决定受精能力的重要因素。其检查方法是：用细玻璃管取一滴精液，滴于载下片上；再取一滴0．9%氯化钠溶液与精液混合。然后用显微镜放大400—600倍进行检查（室温应在摄氏10－25度）。根据呈直线前进运动精子的百分数，评定等级。
公羊精子活率五级制评定法：用%表示，呈直线前进运动的精子占100%评为5分；占80%评为4分；占60%评为3分；占40%评为2分；占20%评为1分；精子呈静止状态为静止；仅绕小圈不能直线前进为回旋；尾部只做左右摆动摆动；全部死亡为死。
（3）变态精子：凡形状不正常的精子，都叫变态精子或病态精子和畸形精子，见图2。
形成变态精子的原因：睾丸和副睾有疾病时，即产生巨形或短小精子；
公羊长期休闲，精子在睾丸内停留时期过长，精子衰老或解体，即形成头尾分离的精子；配种过度，或饲养不当，引起公羊性欲衰竭，即产生颈，体尾部带有原生质颗粒的精子和不成熟精子；精液稀释不当，或采精时有水混入精液，可使精子尾部膨胀，或卷向一侧。采精方法、采精用具和精液处理不当等各种因素，都有造成变态精子的可能性；变态精子均无受精作用，如其百分率高，母羊受胎率就会降低。因此，变态精子的检查，也是一项很重要的工作。
检查变态精子的方法如下：按一般抹片方法，取一没稀释精液于载玻片上抹片，经1～2分钟使其干燥；浸入96%酒精中，固定2～3分钟，用蒸馏水冲洗；用蓝墨水或红墨水（美蓝、沙黄、一品红等染色剂）染色，经1～2分钟，再用蒸馏水冲净染色液；待抹片干燥后，置于显微镜下放大600倍检查在500－1000个精子总数中有多少畸形精子，最后用下列公式，即求得变态精子的百分率。羊精液中变态精子不得超过12%，如超过时，不可使用。
变态精子百分率=变态精子总数/精子总数×100
（4）精子抗力测定：精子抗力是指精子对1%氯化钠溶液的忍受能力。由于1%氯化钠溶液对精子脂蛋白膜有一定的破坏作用，用量越大，破坏作用也越大。精子越能忍受更多的稀释，则抵抗力也越强。公羊精子的正常抗力不应低于5000，其测定方法如下：
用吸管吸取0.02毫升精液于三角烧瓶内，再用滴定管滴入1%氯化钠溶液10毫升，轻轻摇动，使与精液混合，然后用细玻璃棒从三角烧瓶内取一滴稀释的精液，用显微镜检查。如发现仍有前进活动的精子时，可再如法用1%氯化钠溶液稀释，直到精子完全停止活动为止。测定时室温应在摄氏18－25度，测定时间不超过15分钟。测定后可按下列公式算出精子抗力指数：
例如：用公羊精子0．02毫升，加入100毫升1%氯化钠溶液时，全部精子停止前进活动，求出精子抗力是多少。
依式代入：精子抗力=加入1%氯化钠溶液的总量/0.02
（四）外界因素对体外精子的影响
精子对外界环境条件的影响颇为敏感，有的可使精子活动力降低，有的可使其在短时间内死亡。
1.阳光对精子的影响：直射阳光可使精子活动能力加强，但经验20～40分钟以后，精子即死亡在进行人工授精时，必须加以注意，避免精子受到直射阳光的侵害。
2.温度对精子的影响：温度是影响精子活动能力和生存时间的一个重要因素。温度过高（80－100度）能使蛋白质凝结，因而迅速杀死精子。如使精子逐渐冷却，可降低精子活动和新陈代谢作用，可以延缓精子分解而延长其寿命。精子在摄氏38—41度时，活动能力最高，应及时输精，如延缓时间，由于活动剧烈，新陈代射旺盛，会很快衰老和死亡。温度骤然升高和下降，都能影响精子活动和生存时间。因此，在进行人工授精时，应随时注意保持适当的温度。
3.渗透压对精子的影响：精子只有在等渗压中，才能保持其生活能力，高渗或低渗压都可导致精子死亡。精子在高渗透压溶液里，精子内部压力低于溶液，精子水分被吸收而发生萎缩，尾部呈锯齿曲折而死亡；精子在低渗溶液或普通的水里，水分渗入精子内部，使其尾部膨胀、卷曲而死亡。根据试验，0．9%氯化钠溶液接近于家畜精子的渗透压。
4.酸碱度（pH值）对精子的影响：酸碱度是以氢离子指数表示。在pH7时，表示中性溶液；pH值小于7者，表示酸性，pH值愈小酸性越大；pH值大于7者，表示碱性，pH值愈大碱性愈大，家畜的精子需要在一定酸碱度的溶液内才能在存。公羊精液的酸碱度为6．2～6．8，过高过低都会使精子死亡。
5.其他如化学药品（酸、碱和消毒药品），金属（铜和铁的制品），烟雾以及振荡等对精子有害。因此，在人工授精过程中要注意防止。
（五）精液的稀释保存和运输
1.稀释精液的目的：稀释精液的主要目的是增加精液量，扩大母畜的授精头数；促进精子的活力，延长精子的存活时间，提高母畜受胎率；便于精液的保存和运输。
精液稀释后，精子比原精液的精子存活时间较长的道理是：稀释液能供给精子代谢所需的营养物质；消除副性腺分泌物对精子的副作用；缓冲精液的酸碱度。副性腺分泌物在一定时间里虽能促进精子的活力和供给精子养分，但其中含有大量的盐（钠、钾），有破坏精子脂蛋白膜的作用，可缩短精子的生存时间。因此，对副性腺分泌物地体外精子的长期保存是不利的。
2.稀释液必具的条件：对精子无侵害作用；供给精子养分，保护精子细胞膜和延长精子生存时间；与精液有相等的渗透压；有缓冲作用；配方简易省线。
3.公羊精液的稀释液及其配方；试用于羊的稀释液种类很多。例举如下：
（1）卵黄磷酸化合物稀释液：磷酸氢二钠 20克，磷酸氢二钾 2克，蒸馏水 1000毫升。用上述配方制成缓冲剂，再加2%的新鲜卵黄。
（2）1%氯化钠溶液：氯化钠 1克；蒸馏水 100毫升；
（3）生理盐水：氯化钠 0．89克，蒸馏水 100毫升，
以上三种溶液中，第一种效果很好，在稀释牛精液时，曾被广泛应用用以稀释羊精液也有较好的效果，但在绵羊人工授精站实际应用时，仍感配方复杂，成本较高，一般很少使用。
用后两种溶液稀释精液时，精子在溶液中沉淀很快，而溶液本身的酸碱度不稳定，可降低到5．6～6．2，甚至更低，对精子是有害的。但其配方简易，成本低廉，如不作精液保存，或在稀释精液后立即授精，稀释比在1：3的情况下，仍有较好的效果，很适宜在绵羊人工授精站应用。有的地区十多年实际应用0．9%氯化钠溶液稀释精液，母羊受胎率可达79．4～89．7%。
4.稀释精液的方法及注意事项
（1）精液在采取后，稀释愈早，效果愈好。因此，在采精前应将稀释液配好，以待使用。新采取的精液温度一般在摄氏30度左右，如室温低于30℃时，应将集精瓶放在30℃的保温盒或温水里，以防精子受温度剧烈变化的影响。
（2）精液与稀释液混合时，两者温度必须保持一致。为此，稀释前必须将两种液体放在同一温水中，同时在20～25℃时进行稀释。把稀释液沿着精瓶慢慢倒入，轻轻摇动，使均匀混合。
（3）进行高倍稀释应分两步进行。即先低倍稀释，稍等数分钟再作高倍稀释，可使精子逐渐适应外界条件。
（4）精液稀释后，应立即镜检，观察精子的活率，如活率不好，说明稀释液或操作不当，这种精液应废弃不用。
（5）为了减少的精子能量的损耗，稀释后应尽快地进行的输精。
5.精液的稀释倍数 应根据原精液的浓度和实际授精的需要量来决定。一般规定可将公羊精液稀释二至四倍，但如使用0．9%氯化钠溶液时，应以一比一为宜。发情母羊数量少，公羊精液充足时，还可以降低稀释比，或用原精液输精。
6.精液的运输 在缺少大片草原的地区，人工授精站附近不能容纳全部配种母羊时可分设输精点，每天把公羊精液运送到输精点上给母羊输精。运输精液的方法是：将采取的精液经过检查，精液品质如在“密四‘以上，可将精液装在小试管（经过洗净、消毒和干燥的）内，上盖软木室塞，放入广口瓶，周围用棉花充塞固定，即可运送。这种方法只适于短距离运输，一般不宜超过一小时。
气温过高或过低时，可用广口暖水瓶运输，并根据外界温度，进行降温或保温。具体做法是将检查合格的精液，盛于3毫升的小试管内，加盖软木塞，贴标鉴纸，注明采精时间、公羊号、精液量、精液品质、稀释液种类、稀释比例等，置于有冰块广口瓶内，瓶内温度保持在零度或零度以上。如外界气温在零度到零下3度时，广口瓶内可不加冰块。如在零下5—10度时，瓶内须加5度的冷水。
运送精液时，应尽量缩短时间，并应防止震荡。精液运到输精点以后，必须经过检查，如认为合格，方可给母羊输精。检查时温度必须在38—40度之间，才能检查出精子真正的活率。输精站如缺保温设备时，可做保温箱，将油灯和显微镜放在木箱里进行检查。
7.精液的保存 精子在低温时，活率降低，可以延长生存时间。根据这一原理，即可将新鲜精液稀释后，盛于小试管内加盖软木塞，慢慢降温，一直到零度左右，放在暗处，即可使精子保存较长的时间。在使用时，再取出逐渐升温，经检查后，仍可使用。长时期贮存精液的技术复杂，需要冷藏设备，一般在生产上很少应用。因此不再介绍。
（六）输精
用输精器氢品质合格的公羊精液注入母羊的生殖道里，叫做输精（也叫授精）。输精是决定母羊受胎的重要环节，必须认真操作，做到精液品质合格，输精部位准确。
1.输精方法和步骤
（1）保定母羊。把发情母羊分批赶进待配圈或待配室；逐头固定在输精室的输精架里；输精助手保定母羊，并掀起母羊尾巴于一侧，用小块湿纱布擦净母羊外阴部。
（2）装注精液 将已清毒的输精器用0．9%氯化钠（摄氏30度左右）冲洗3次；然后吸取精液，排除气泡，调整输精器调节钮（调整在0．05或0．1的刻线上）；再用氯化钠棉球拭去尖端外面粘着的精液；最后用氯化钠棉球（略有湿度）包裹输精器尖端。在输精前遮盖毛巾或纱布，防止直射光线和尘埃污染。
（3）输精方法 输精员左手握开膣器，右手持输精器，先将开膣器徐徐插入母羊阴道，轻轻旋转，启开开膣器，寻找子宫颈；然后把输精器尖端，通过开膣器，插入子宫颈里约0．5～1厘米；再用右手拇指轻轻推进输精器活塞，就把精液注入。
输精后，先取输精器，再抽开膣器，并应保持其开张度，避免夹伤阴道粘膜。
（4）输精量 输精数量，应以精液品质、稀释倍数、母羊数量和输精技术来决定。如输精技术不熟练、母羊数量少或精子密度较小时，可以不稀释精液，并且适当加大输精量。
按有关部门颁发操作程序规定：给母羊一次输精量原精液为0．05～0．1毫升。据研究报告：用新鲜的原精液，给母羊子宫颈输精容量至少为0．05毫升，精子需要5千万个；而阴道授精则需要1毫升，内含精子5亿个。
在公羊精液量少，发情母羊高度集中时，采取精液稀释为1：0．5～1，输精量不低于0．05毫升，给母羊输精，仍有较好的效果。某县冬季18个绵羊授精站，授配母羊21，190只，受胎母羊17，350只，受胎率平均达到81．89%（71．3%——95．25%）。
（5）输精时刻和次数 输精时刻与受胎率有密切关系。输精时刻在母羊排卵前不久最为适宜，而排卵时刻大多在接近母羊发情终止时刻，母羊发情持续时间约为30小时。因此，如果采取一天一次输精，应在发情开始后，30小时前不久进行输精为最妥。又据研究报告：输精时刻，应在母羊发情开始后12小时进行第一次输精为宜，如仍继续发情，即每隔12小时进行一次，直到发情终止。但在生产实践中，大群母羊发情开始时刻很难掌握。比如有的地区绵羊人工授精站的输精时刻和次数，一般施行每天早晨一次试情，早晚两次输精的办法。即每天早晨5时试情开始，8时第一次输精，相隔9～10小时，在下5～6时第二次输精；次晨试情时，母羊继续发情，再进行输精。经历年来调查统计，受胎率分别达到75。2%、86%、95%。此后又考虑到当地气候条件和配种季节，为了不妨碍母羊放牧，如某县曾试行每天早晨10～11时一次输精。据5个授精站的母羊受胎调查，平均为86．88%，比年同一配种期两次输精的受胎率降低5．9%。施行秋季配种坚持早晚两次输精，冬季配种采取配种开始前10天，每天早晨（10～11时）一次输精，10天以后，每天进行早晚两次输精的办法。这样就基本达到了配种不误羊吃草的要求。
2.输精应注意的事项
（1）精液品质必须符合“密五”的标准。在稀释前后和输精前都应检查精子密度和活动力，如品质不好的，不可使用。
（2）用0．9%氯化钠作稀释液时，在一般情况下精液稀释倍数不应超过1：1，输精量不应少于0．05毫升。
（3）输精部位必须正确。成年母羊必须输入子宫颈内；处女羊，阴道狭窄，开张不易，可在子宫颈附近或阴道里输精，但输精量应增加到0．5～1毫升（稀释精液）。在阴道开张后，寻找子宫颈时，如发现母羊阴道化脓或有炎症等，应不予输精。
（4）输精用具应按程序处理，输精器在装注精液前必须用0．9%氯化钠溶液（30℃左右）冲洗5次，每输精一次，输精器尖端必须用氯化钠棉球擦拭，酒精棉球消毒，用氯化钠棉球包裹。
在输精前，应将开膣器和母羊外阴部用0．9%氯化钠棉花擦拭以增加滑度。每用一次开膣器，即按顺序用清水洗净，开水消毒后再继续使用。
（5）输精室必须清洁、光亮，输精时室温应保持在摄氏18～25℃。冬季配种时，更应注意室温，尽可能达到18℃。
（6）输精完毕，应将器械彻底清洗，用65%酒精消毒，放在瓷盘里，加盖清洁白布，以备下次使用。
